射干和野鳶尾同屬鳶尾科植物,主要化學成 分為射干苷、野鳶尾苷、鳶尾黃素、野鳶尾黃素、 次野鳶尾黃素、白射干素等異黃酮類化合物, 具有顯著的鎮痛、止咳、抗炎抑菌和抗病毒等多 種藥理作用。根據報道,植物在不同的 生長期,其植物內的有效成分含量可能發生變化,從而影響藥材的質量。本文對射干和野 鳶尾在開花前及開花期有效成分的變化進行研 究,為合理開發利用鳶尾科植物資源提供理論依 據。
1 儀器與材料
Agilent1100 高 效 液 相 色 譜 儀(美 國 安 捷 倫 科 技 公 司),昆山舒美KQ-250DB 超 聲 波 儀 器(超 聲 功 率 120 W,工 作 頻 率 40 Hz,昆 山 市 超 聲 儀 器 有 限 公司),FA1004 電子天平(上海精密科學儀器有 限公司),射干苷(中國食品藥品檢定研究院,批 號 111632-200501),野鳶尾苷(成都普瑞法科技有限公司,批號 13030803),鳶尾黃素(成都普瑞 法 科 技 有 限 公 司,批 號 12081808),野 鳶 尾 黃 素 (江蘇永健醫藥科技有限公司,批號 20140609), 次野鳶尾黃素(中國食品藥品檢定研究院,批號 111557-200602),白射干素(江蘇永健醫藥科技有 限公司,批號 20140621)。乙腈,磷酸(TEDIA 上海 天地試劑有限公司),水為娃哈哈純凈水(杭州娃 哈哈集團有限公司),射干和野鳶尾藥材,分別于 2016 年春季 5 月(開花前)和夏季 7 月(開花期)在 本溪小窯山采集,經遼寧中醫藥大學李峰教授鑒 定,分別為射干(Belamcanda chinensis DC.)和野鳶 尾(Iris dichotoma Pall),見表 1。
2 方法與結果
2.1 溶液的制備
2.1.1 對照品溶液
分別取射干苷、野鳶尾苷、鳶尾黃素、野鳶尾 黃素、次野鳶尾黃素、白射干素對照品適量,精密稱定,先分別加二甲亞砜約 0.2 mL 使溶解,再分別 加甲醇制成每 1 mL 各含 1.226、1.238、1.212、1.381、 1.675、1.323 mg·L-1的溶液作為單一對照品儲備 液。分別精密吸取上述溶液 1、2、0.5、2、1、0.5 mL, 置同一 10 mL容量瓶中,加 70% 乙醇稀釋至刻度,作 為混合對照品儲備溶液。
2.1.2 供試品溶液
取射干及野鳶尾藥材粉末各 0.2 g,精密稱定, 置 50 mL 具塞錐形瓶中,精密加入 70% 乙醇 25 mL, 稱定重量,超聲提取 30 min,放冷,稱重,用 70% 乙醇 補足減失的重量,濾過,棄去初濾液,續濾液備用。
2.2 色譜條件
采用 kromasil C18色譜柱,流動相為乙腈(A) 和 0.1% 磷 酸 溶 液(B)兩 相 梯 度 洗 脫;洗 脫 程 序:0~15 min,A 為 15%~25%;15~35 min,A 為 25%~35%;35~50 min,A 為 35%~50%;檢測波長為 265 nm;柱溫 40 ℃,流速 1.0 mL·min-1。混合對照 品(A)射干(B)及野鳶尾(C)供試品的典型色譜圖 見圖 1。
3 討論
采用 HPLC 法同時測定開花前和開花期 射干和野鳶尾藥材中射干苷、野鳶尾苷、鳶尾黃素、 野鳶尾黃素、次野鳶尾黃素、白射干素 6 種有效成分 的含量,方法簡單,重現性和準確度良好。
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