巴戟天 How 為茜草科植物，其根 入藥，具有補腎陽、強筋骨、祛風濕的功效，用于陽痿遺 精，宮冷不孕，月經不調，少腹冷痛，風濕痹痛，筋骨痿軟。巴戟天主要成分包括蒽醌類、環烯醚萜苷類、糖類、氨基酸等。其中糖類成分一直是人類研 究的重點，但近些年來巴戟天所含的環烯醚萜類成分 也引起了研究者的關注。現代藥理研究表明，巴戟天 屬植物中環烯醚萜具有抗菌、抗氧化、抗腫瘤、抗炎及 鎮痛等廣泛的藥理作用，為對該類成分開發進行深入 研究奠定了基礎。巴戟天中單一環烯醚萜成分測定已 有較多研究，但總環烯醚萜類成分含量測定未見報導。

1 材料

1.1 儀器

UV- 1800紫外分光光度計（日本島津儀器有限公 司）；昆山舒美KQ-500DE 型數控超聲波清洗器（昆山市超聲儀 器有限公司）；水浴鍋（國華電器有限公司）；BSA224SCW萬分之一電子天平（塞多利斯科學儀器（北京）有限 公司）；BT25S 十萬分之一電子天平（塞多利斯科學儀 器（北京）有限公司）；Milli-Q超純水系統（美國Millipore 公司）。

1.2 試藥

巴戟天（藥材為實驗室成員親自赴各地采集，其產 地或來源見表1），經湖北中醫藥大學藥學院中藥資源 與中藥化學湖北省重點實驗室葉曉川研究員鑒定為茜 草科植物巴戟天 How的肉質根。甘 草（湖北天濟中藥飲片有限公司，批號：201608004）； 水晶蘭苷（成都植標化純生物技術有限公司，批號： 151209，純度>98%）；食鹽（湖北鹽業集團有限公司專 營）；黃酒（浙江越景紹興酒有限公司）；水為蒸餾水， 其余試劑均為國產分析純（國藥集團化學試劑有限公 司）。

2 方法與結果

2.1 巴戟天炮制品的制備

取編號 Y1（凈巴戟天）炮制，制備巴戟肉、鹽巴戟、 酒巴戟、制巴戟，一式三份。 巴戟肉：取凈巴戟天100g，照蒸法（《中國藥典》 2015版通則0213)，加水30mL 拌勻，潤30min，蒸30min， 趁熱去木心，得到巴戟肉及其木心，干燥。 鹽巴戟：取凈巴戟天100g，照鹽蒸法（《中國藥典》 2015版通則0213)，2%食鹽水加入拌勻，潤90min，蒸15 min，趁熱去木心，干燥。 酒巴戟：取凈巴戟天100g，加10mL 黃酒拌勻，潤 60min，蒸30min，趁熱去木心，干燥。 制巴戟：取甘草6g 加水50mL 微沸90min，過濾后 藥渣加水50mL 微沸90min，合并濾液調為甘草汁100 mL。取凈巴戟天100g，照煮法《( 中國藥典》2015版通則 0213)，加100mL 甘草汁拌勻，潤10min，煮至汁收盡，趁 熱去木心，干燥。 另取凈巴戟天直接剝取得到凈巴戟肉及凈巴戟木心。以上所有樣品60℃干燥后粉碎，過40目篩，備用。

2.2 對照品溶液的制備

取水晶蘭苷對照品適量，精密稱定，加70%乙醇配 制成濃度為0.65mg/mL 的對照品溶液。

2.3 供試品溶液的制備

取巴戟天粉末約0.05g，精密稱定，置于100mL錐形 瓶中，加入70%乙醇25mL，稱重，浸泡30min，超聲處理 60min，搖勻，濾過，即得供試品溶液。

2.4 顯色條件

取供試液0.5mL于10mL試管，加70%的乙醇溶液至 1mL，加1mol/LHCl 溶液2mL，90℃水浴15min，冷卻至 室溫，加0.1%2，4-二硝基苯肼乙醇溶液0.5mL，搖勻， 90℃水浴25min，冷卻至室溫，加1mol/LNaOH溶液3mL， 室溫放置1h，以70%的乙醇溶液為空白對照。

2.5 最大吸收波長的測定

精密吸取對照品溶液和供試品溶液各1mL，按上述 顯色條件顯色，在400～800nm 范圍內進行掃描。結果 表明，對照品和供試品在455～460nm處都有最大吸收， 本實驗最大吸收波長選為455nm。

2.6 標準曲線的繪制

分別精密吸取水晶蘭苷對照品溶液0.1、0.2、0.3、0.4、 0.5、0.6mL 置入10mL 試管，加70%乙醇至1mL，按上述 顯色條件進行顯色，以70%乙醇反應液為空白在455nm 處測定吸光度，吸光度值分別為0.179、0.342、0.476、 0.612、0.768、0.931。以對照品濃度為橫坐標（X），吸光 度值 (A) 為縱坐標（Y），繪制標準曲線，得回歸方程 Y=14.783X+0.03393，R 2 =0.9987。結果表明水晶蘭苷在 0.01～0.06mg/mL 范圍內線性關系良好。

2.7 方法學考察

2.7.1 精密度試驗

取對照品溶液，按顯色條件顯色， 顯色后 1h 連續測定 6 次吸光度，其吸光度值分別為 0.436、0.436、0.435、0.436、0.437、0.435，RSD= 0.178% ， 表明儀器精密度良好。

2.7.2 穩定性試驗

取供試品溶液，按顯色條件顯色， 在 15min、30min、45min、60min、90min、120min測定其吸 光度，其吸光度值分別為 0.437、0.436、0.435、0.434、 0.435、0.434，RSD=0.271%，表明在 2h 內穩定性良好。

2.7.3 重復性試驗

精密稱取編號Y4 巴戟天粉末 6 份， 制成供試品溶液，按顯色條件進行顯色，測定吸光度并 計算 含量，結果分 別為 21.96%、20.39%、22.17%、 21.21%、22.39%、22.46%，平均含量 21.76%，RSD = 3.72%，表明此法重復性良好。

2.7.4 加樣回收試驗

精密稱取編號 Y4 巴戟天粉末 9 份，每份 0.025g，分別精密加入水晶蘭苷對照品 6.6mg、 5.5mg、4.4mg，一式三份，制備供試品溶液，按顯色條件 進行顯色，測定并計算回收率分別為 102.12%、98.07%、 96.38%，平均回收率為 98.85%，RSD=2.99%，表明此方 法準確度高。

3 討論

本實驗采用超聲提取法制備供試品溶液，分別考察 了15min、30min、45min、60min、90min超聲提取。結果 表明超聲時間為60min 時供試品中總環烯醚萜含量最 高，故選取60min 為超聲時間。 巴戟天生長在山坡上，廣東省的肇慶市、云浮市為 主產區。實驗結果顯示，同一市不同縣及同一縣不同 鄉鎮所產巴戟天總環烯醚萜存在差異，這可能與巴戟 天生長的土質、海拔高度、陽光照射時間等有關。檢測的23個樣品總環烯醚萜含量差異較大，但大部分在 20%~30%之間。福建省4個不同生長年限樣品含量測 定結果顯示，巴戟天總環烯醚萜累積隨著年限增長呈 先上升然后又下降的趨勢，但其動態變化規律還需進 一步深入研究。


 

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