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飛龍掌血中紅堿含量變化的影響分析(KQ5200B使用

返回列表 來源:未知 發布日期:2019-12-12 09:00【

飛龍掌血為蕓香科飛龍掌血屬植物飛龍掌血 (Toddalia asiatica Lam.)的根或根皮,又名黃椒根、 血蓮腸、血見飛、血見愁、大救駕(貴州)、三百棒(湖 南、湖北、陜西)、散血丹(廣西),為中國傳統民族 藥 ,主產于廣西、廣東及貴州等地,具有活血化瘀、 止痛、止血、驅風除濕之功效 。藥理學研究表明, 該藥具有鎮痛、抗炎、抗菌、抗病毒、抗腫瘤及抗血 小板聚集的作用;臨床上也常用于治療跌打損傷、 風濕性關節炎、多種痛癥和出血癥 。


1 儀器與試藥 


1. 1 儀器

Agilent 1260 型超高效液相色譜系統、Lambda265 型 PDA 紫外檢測器,美國安捷倫有限公司; DHG-9240A型電熱鼓風干燥箱,上海一恒科學實驗 儀器有限公司;Milli-Q Advantage A10型純水儀,美 國密理博超純水系統;SQP電子天平,賽多利斯(上 海)科學儀器有限公司;昆山舒美KQ5200B型超聲波清洗器, 昆山市超聲儀器有限公司;DFY-300C 型搖擺式高 速粉碎機,溫嶺市林大機械有限公司;H1650-W 型 離心機,湖南湘儀實驗室儀器開發有限公司。

1. 2 試藥


黃酒(酒精度:7.12%),浙江越龍山紹興酒股份 有限公司釀造;甲醇、磷酸(分析純),國藥集團化學 試劑有限公司;乙腈(色譜純),德國賽默飛世爾科 技有限公司。 飛龍掌血根皮對照藥材(批號為121410-200701)、 白屈菜紅堿對照品(批號為 111718-201402),均為 中國食品藥品檢定研究院。 飛龍掌血藥材采購于廣西來賓市金秀鎮瑤都 廣場藥材街,經廣西中醫藥大學韋松基教授鑒定為 蕓香科飛龍掌血屬植物飛龍掌血T. asiatica Lam.的 根。

2 方法與結果

2. 1 藥材炮制加工

炮制加工方法以2015年版《中華人民共和國藥 典》 炮制通則中記載的方法為基礎,結合實際情 況改良而成,具體炮制方法如下。 水洗法:稱取大小分檔后飛龍掌血藥材10 g,平 行取3份,分別投入足量自來水中快速清洗,至藥材 表面浸潤無泥沙后取出,置60℃恒溫鼓風干燥箱內 干燥,干燥后打粉過篩,標簽備用。即得飛龍掌血水洗炮制品。 水煮法:稱取大小分檔后飛龍掌血藥材10 g,平 行取3份,分別置不銹鋼鍋內,加自來水至剛浸沒藥 材為度,文火加熱,煮至藥材變軟內無干心時取出, 置 60℃恒溫鼓風干燥箱內干燥,干燥后打粉過篩, 標簽備用。即得飛龍掌血水煮炮制品。 水蒸法:稱取大小分檔后飛龍掌血藥材10 g,平 行取3份,分別置不銹鋼蒸鍋內,加足量自來水后, 隔水加熱,待武火加熱至水沸后改文火加熱,蒸至 藥材變軟色澤暗淡時取出,置60℃恒溫鼓風干燥箱 內干燥,干燥后打粉過篩,標簽備用。即得飛龍掌 血水蒸炮制品。 酒蒸法:稱取大小分檔后飛龍掌血藥材10 g,平 行取3份,分別置不銹鋼蒸鍋內,加入適量黃酒后, 隔酒文火加熱,蒸至藥材變軟色澤暗淡時取出,置 60℃恒溫鼓風干燥箱內干燥,干燥后打粉過篩,標簽 備用。即得飛龍掌血酒蒸炮制品。 酒炙法:稱取大小分檔后飛龍掌血藥材10 g,平 行取3份,分別加適量黃酒與藥材拌勻悶潤,待酒被 吸盡后,用文火炒至藥材表面微干,呈暗棕色,略帶 焦斑時,取出晾涼,篩去灰屑后打粉過篩,標簽備 用。即得飛龍掌血酒炙炮制品。

2. 2 含量測定方法

2. 2. 1 對照品溶液的制備

精密稱取白屈菜紅堿 對照品0.74 mg,加甲醇定容至25 ml容量瓶,作為標 準對照品儲備液,備用。

2. 2. 2 供試品溶液制備

稱取藥材粉末和對照藥 材粉末各 0.2 g,精密稱定,置 50 ml 錐形瓶中,加甲 醇 10 ml,稱定,超聲提取 30 min,冷卻至室溫并補 重,搖勻,過濾,取續濾液至1.5 ml離心管中,14 465.5×g 離心10 min,吸取上清液備用。

2. 2. 3 色譜條件

色譜柱:Agilent TC-C18(250 mm× 4.6 mm,5 μm);流動相:乙腈(A)-1%磷酸水溶液 (B);梯度洗脫:0~30 min,30%B;35~45 min,30% B~45% B;45~50 min,45%B;50~51min,45% B~ 15% B;流速:1.0 ml/min;檢測波長:320 nm;柱溫: 30℃;進樣量:10 μl。柱效以白屈菜紅堿峰計算,理 論塔板數不<5000。 在此色譜條件下,對照品溶液、對照藥材溶液 及藥材生品溶液進行測定,見圖1;譜圖1A顯示,白 屈菜紅堿對照品色譜峰峰型較好,保留時間為 36.879 min;譜圖1B飛龍掌血對照藥材色譜圖顯示 白屈菜紅堿色譜峰峰型良好,保留時間是 36.765min,分離度2.62>1.5,完全分離;譜圖1C飛龍掌血 藥材生品色譜圖顯示白屈菜紅堿色譜峰峰型良好,

1576112535775731.png 保留時間是 36.580 min,分離度 5.78>1.5,完全分 離。

2. 2. 4 方法學考察

標準曲線與線性范圍:量取 2. 2. 1項對照品母液1.0 ml分別置1、2、5、10和25 ml 容量瓶中,加甲醇定容至刻度線,按2. 2. 3項色譜條 件進行測定,以峰面積(y)為縱坐標,濃度(x)為橫坐 標,得白屈菜紅堿的回歸方程 y=34.986x+15.421, (r 2 =0.9992),線性范圍1.184~29.6 mg/L。 精密度:量取2. 2. 1項對照品母液1.0 ml置5 ml 容量瓶中,加甲醇定容至刻度線,按2. 2. 3項色譜條 件連續進樣6次,測得白屈菜紅堿峰面積的RSD為 2.61%(n=6),表明儀器的精密度良好。

3 討論


本研究以飛龍掌血的功能主治和臨床應用方 法為依據,通過研究水洗、水煮、水蒸、酒蒸、酒炙等 炮制方法對飛龍掌血中白屈菜紅堿含量變化的影 響,明確了白屈菜紅堿在不同炮制方法中的變化規 律,為飛龍掌血的炮制研究、臨床應用開發提供了 一定參考依據。





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